離心式去垢劑去除柱

● 產(chǎn)品組成：

● 產(chǎn)品介紹：

離心式去垢劑去除柱能夠通過離心快速去除蛋白溶液或質(zhì)譜分析中肽段溶液中的常用去垢劑，包括離子型去垢劑，非離子去垢劑和兩性離子去垢劑。在蛋白實(shí)驗(yàn)中，去垢劑在促進(jìn)蛋白溶解，增加蛋白穩(wěn)定性以及阻止蛋白聚集方面都有重要作用。然而，蛋白溶液中的去垢劑會對下游實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響，如ELISA，等電聚焦以及質(zhì)譜分析等。在質(zhì)譜分析中，去垢劑會與肽段形成加合離子抑制肽段離子化，導(dǎo)致m/z值的遷移。因此，質(zhì)譜分析中去除肽段溶液中多余的去垢劑是影響分析結(jié)果的重要因素。該去除柱可以高效（＞95%）去除樣品中各種常用的去垢劑（濃度范圍1-5%）。

去垢劑去除柱參數(shù)如下：

● 貯存、運(yùn)輸和效期：

4℃貯存（不能冷凍）；常溫運(yùn)輸；有效期1年。

● 操作步驟

一、 去垢劑去除柱預(yù)處理：

1.1 取出柱子，放入套管中。  

1.2 旋開管蓋，不要擰掉柱子底部堵頭，加入0.4 ml 1×PBS，蓋緊管蓋，常溫靜置2 min，活化填料。

1.3 擰掉柱子底部堵頭，將柱子放入套管中，1000 g 離心1 min，棄流穿液。

注：離心力不要高于1000 g，過高的離心力會損傷填料，降低去垢劑去除效率。

1.4在柱子管蓋上標(biāo)記填料在柱子內(nèi)的傾斜方向，隨后離心步驟均按同一傾斜方向在離心機(jī)內(nèi)放置柱子。

1.5柱子中加入0.4 ml 1×PBS，1000 g 離心1min，棄流穿液。至此，柱子活化結(jié)束，備用。

二、樣品去垢劑去除：

2.1 將柱子轉(zhuǎn)移到2 ml尖底離心管中，加入25-100 μl待處理樣品（樣品濃度高于0.5 μg/μl），常溫靜置2 min。

2.2 1000g 離心2 min，收集離心管內(nèi)樣品。

● 注意事項(xiàng)：

1. 去垢劑去除效果：可以高效的（＞95%）去除樣品中各種常用的去垢劑（濃度范圍1-5%）。

2. 樣品處理體積要在柱子處理范圍內(nèi)，該去除柱最多處理體積是100 μl樣品，過多會導(dǎo)致收集 

管中液體浸沒到去除柱。

3. 當(dāng)樣品濃度過低時（<0.5 μg/μl)，需先將樣品濃縮到所需體積或所需濃度。

● 常見問題：

● 實(shí)驗(yàn)示例：