10×膜蛋白A型上樣緩沖液

● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

該產(chǎn)品配套動(dòng)物膜蛋白提取試劑盒（貨號(hào)：RTD8111，RTD8112）和動(dòng)物線粒體提取試劑盒（貨號(hào)：RTD8115，RTD8116）使用。產(chǎn)品含有甘油和G-250，為10倍濃度，使用時(shí)稀釋10倍使用。產(chǎn)品用于Blue-Native電泳上樣使用，不適用于其他系統(tǒng)（如Tris-甘氨酸系統(tǒng)，Bis-Tris系統(tǒng)，HEPES系統(tǒng)，Tricine系統(tǒng)等）電泳。

● 貯存、效期和運(yùn)輸：

-20℃貯存；一年有效；濕冰運(yùn)輸。

● 使用方法：

1 膜蛋白BN非變性樣品處理：

1.1 建議使用50 μl膜蛋白重懸液（BN電泳用）（貨號(hào)：PN1020）重懸膜蛋白沉淀；

1.2 BCA方法測(cè)定蛋白濃度（貨號(hào)：RTP7102）；

1.3 用膜蛋白重懸液（BN電泳用）調(diào)整蛋白濃度為1 μg/μl，按需分裝，每管50 μl，-80℃保存待用；

1.4 取一管50 μl樣品，溶化混勻后4℃ 16000 g 5分鐘，去除上清，保留沉淀；

1.5 沉淀中加入50 μl膜蛋白增溶液A（貨號(hào)：DM1080），輕柔重懸沉淀，盡量不產(chǎn)生氣泡，冰浴10分鐘；

1.6 4℃ 16000 g 15分鐘，取上清至一干凈1.5 ml離心管中即為增溶后膜蛋白溶液（小心不要吸取沉淀），此時(shí)得到的膜蛋白濃度為1 μg/μl，其中去垢劑DDM（n-Dodecyl β-D-maltoside，β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷）終濃度為1%；

1.7 膜蛋白溶液中加入1/10體積10×膜蛋白A型上樣緩沖液（配套膜蛋白增溶液A使用）（貨號(hào)：PL130），使用BN凝膠電泳（貨號(hào)：RTD6139，RTD6140），每個(gè)泳道上樣5-20 μg。