核酸染料選擇指南，請(qǐng)點(diǎn)擊http://13-13.cn/news_detail.aspx?NewsID=24

SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO，電泳級(jí))

●  產(chǎn)品規(guī)格：

● 簡(jiǎn)介：

SYBR Green是高靈敏的DNA熒光染料，適用于各種電泳分析，操作簡(jiǎn)單，至少可檢出20 pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green 與dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800-1000倍，用SYBR Green染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低，可適用于多種電泳分析。

SYBR Green適合于多種凝膠電泳方法：瓊脂糖凝膠，聚丙烯酰胺凝膠電泳，脈沖電場(chǎng)凝膠電泳以及毛細(xì)管電泳等。SYBR Green與雙鏈DNA的親和力非常高，因此可以用做電泳前染色，對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶（如：Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用。另外，SYBR Green與EB相比，誘變能力大大降低。

● 貯存：4℃，避光保存。

●  SYBR Green使用方法：

注意：染料使用前應(yīng)在室溫下徹底融化混勻后使用。

SYBR Green后染方法（推薦方法）

1. 制作不含染料的凝膠，按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2. 用pH 7.0 - 8.5 的緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀釋SYBR Green濃縮液（如50ml 1×TAE中加入5μl 染料），混勻，制成染色溶液。

3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘，染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上，讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板，并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理（避免染料吸附在玻璃表面上）。

4. 紫外燈下觀測(cè)。

SYBR Green預(yù)染方法

1. 制膠：按常規(guī)方法制備凝膠，凝膠溫度降至60℃左右時(shí)加入10000×SYBR，使染料終濃度為1×，如40ml凝膠溶液中加入4μl染料。

2. 上樣、電泳后紫外燈下觀察。

● SYBR Green使用注意事項(xiàng)

1．后染方法是推薦方法，能得到更好的電泳結(jié)果；由于SYBR對(duì)樣品過量非常敏感，預(yù)染方法容易出現(xiàn)條帶扭曲變形（建議泳道中每條帶的含量不要超過5ng），請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況摸索出適合自己的實(shí)驗(yàn)程序，

2. SRBR對(duì)電泳緩沖液的pH要求嚴(yán)格，有效pH為7.5-8.0，電泳時(shí)盡量使用新鮮配制的緩沖液，并保證合適的pH范圍。

3. SYBR Green 對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

4. 使用酒精沉淀核酸中，SYBR Green可以全部從雙鏈核酸上去掉。

5. 如果想對(duì)用 SYBR Green染過的膠進(jìn)行 Southern blot，建議在預(yù)雜交和雜交溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS，可以有效去除SYBR。