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Real Taq DNA聚合酶

Real Taq DNA聚合酶

產(chǎn)品編號:RTC3102-02

產(chǎn)品規(guī)格:500U

相關(guān)規(guī)格:
數(shù)量
價格 ¥80

Real Taq DNA Polymerase

● 儲存條件:-20 保存

● 濃    : 5 U/ml

產(chǎn)品簡介

Real Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達后分離純化的,其分子量為94 KD。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,無3’-5’外切酶活性。在PCR反應(yīng)中,Real Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘,產(chǎn)物3’端帶A,可直接用TA載體克隆。

活性定義

1單位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定義為在74、30分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

10×Taq Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。

適用范圍

一般用于DNA片段的PCR擴增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測定、平末端加A等,產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。

反應(yīng)舉例:

注意:以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)系統(tǒng),僅供參考。實際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物長短等具體情況,設(shè)定最佳反應(yīng)條件。

以人基因組DNA為模板,擴增1 kb的片段

1. 反應(yīng)體系的建立:50 ml反應(yīng)體系如下(可根據(jù)比例放大或縮小反應(yīng)體系)

 

Template

<1mg

Primer 110 mM

1 ml

Primer 210 mM

1 ml

10×Taq Buffer

5 ml

dNTP Mixture(10 mM)

1 ml

Taq (5 U/ml)

0.5 ml

ddH2O

補至 50 ml

2.  PCR反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置:

94 3 min

94 30 sec

55 30 sec      30 cycles

72 1 min

72 5 min

3.  結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取5 ml反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。


 
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